超濾管采用離心方式快速處理樣品,是很多科研小伙伴們每天要用到的基本裝備。但是,我們發(fā)現(xiàn)近90%的使用者在選擇和使用過程中因為缺乏必要信息而沒有獲得好體驗,更重要的是,寶貴的樣本會遭受本可避免的損失!登寧小編就教你正確使用超濾管。
選對截留分子量,事半功倍
如果目的蛋白是120kDa,請問應該選擇的超濾管規(guī)格是100k,50k,還是30k甚至10k?你采用1/2,1/3抑或1/6算法?一個確定NMWL 的超濾膜應該截留至少90% 以上的這個大小的球形分子,即100kDa的球形蛋白用100k的Ultracel再生纖維素膜得率超過90%。膜孔徑要小于目的分子。因為樣品分子形狀不同,為了zui大化樣品的回收,對于沒有參考的樣品,可以初步選擇截留分子量約為目的分子分子量1/2的膜。
倒轉(zhuǎn)離心,增大回收率
收取體積已經(jīng)很小的濃縮好的樣品時,超濾管上樣體積有0.5/2/4/15/70mL等,除了采用低吸附的管材和zui低蛋白吸附的再生纖維素超濾膜,其中0.5mL,2mL和70mL的規(guī)格還特別設計了反轉(zhuǎn)回收模式,以便使已經(jīng)濃縮的樣品增大回收率。
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